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先說說柱(zhu)子能(neng)不能(neng)反沖(chong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)問題(ti),色(se)譜柱(zhu)到(dao)底能(neng)不能(neng)反沖(chong)?如果色(se)譜柱(zhu)兩端的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)篩(shai)板(ban)孔徑(jing)相(xiang)同(tong)反沖(chong)是不會(hui)(hui)有(you)什么(me)(me)問題(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de),從填料(liao)(liao)流失的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)角度(du)來(lai)說,粒徑(jing)為(wei)5um,而篩(shai)板(ban)孔徑(jing)為(wei)2um,這(zhe)種(zhong)情況(kuang)下正(zheng)沖(chong)反沖(chong)都不會(hui)(hui)造(zao)成(cheng)(cheng)填料(liao)(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)流失;此外,從柱(zhu)子裝(zhuang)填的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)角度(du)來(lai)說,裝(zhuang)柱(zhu)時是按照與柱(zhu)身箭頭(tou)相(xiang)反的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)(fang)(fang)向(xiang)(xiang)裝(zhuang)填的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de),與反沖(chong)時的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)液體流路方(fang)(fang)(fang)(fang)向(xiang)(xiang)相(xiang)同(tong),裝(zhuang)柱(zhu)時那么(me)(me)高(gao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)壓(ya)力(通常(chang)大于40MPa)下用(yong)頂替液沖(chong)刷都沒(mei)有(you)問題(ti),難道區(qu)區(qu)1ml/min流速下的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)十幾個MPa會(hui)(hui)造(zao)成(cheng)(cheng)柱(zhu)床(chuang)松動?更何況(kuang)反沖(chong)時通常(chang)用(yong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)要么(me)(me)是90%水、要么(me)(me)是90%或純的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)有(you)機相(xiang),這(zhe)么(me)(me)低的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)壓(ya)力又能(neng)對柱(zhu)床(chuang)造(zao)成(cheng)(cheng)什么(me)(me)樣的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)損傷?還有(you),填料(liao)(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)C18長鏈(lian)是鍵合在裸硅膠上的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de),碳鏈(lian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)自由(you)舒展對分析是最有(you)利的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de),不是說你長期朝(chao)一個方(fang)(fang)(fang)(fang)向(xiang)(xiang)使用(yong)碳鏈(lian)就像水草一樣朝(chao)一個方(fang)(fang)(fang)(fang)向(xiang)(xiang)倒,用(yong)甲醇或乙腈等(deng)沖(chong)洗(xi)之后(hou)它(ta)會(hui)(hui)回復(fu)自由(you)舒展狀態的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de),即使它(ta)們確實朝(chao)一個方(fang)(fang)(fang)(fang)向(xiang)(xiang)倒,那么(me)(me)反向(xiang)(xiang)沖(chong)洗(xi)讓它(ta)們恢(hui)復(fu)一下初始狀態豈不是更好?所以我認為(wei)反向(xiang)(xiang)沖(chong)洗(xi)不會(hui)(hui)對柱(zhu)床(chuang)造(zao)成(cheng)(cheng)影響。
那哪(na)些柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)子不(bu)(bu)(bu)能(neng)反(fan)(fan)(fan)向沖(chong)洗(xi)呢?我認為(wei)(wei)有(you)兩(liang)種(zhong)是(shi)不(bu)(bu)(bu)能(neng)反(fan)(fan)(fan)向沖(chong)洗(xi)的(de)(de),一(yi)(yi)種(zhong)是(shi)兩(liang)端(duan)篩板(ban)不(bu)(bu)(bu)一(yi)(yi)樣(yang)(yang)不(bu)(bu)(bu)宜進(jin)行反(fan)(fan)(fan)沖(chong)操(cao)作,因(yin)為(wei)(wei)入口端(duan)篩板(ban)孔徑(jing)大一(yi)(yi)些會(hui)比(bi)較能(neng)耐固體(ti)顆粒(li)物質的(de)(de)堵(du)塞,至(zhi)少被堵(du)的(de)(de)時(shi)間會(hui)相對(dui)較長,這(zhe)種(zhong)情況下一(yi)(yi)旦(dan)反(fan)(fan)(fan)沖(chong)就有(you)可能(neng)造成填(tian)料(liao)的(de)(de)流失,導致柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)效下降。另一(yi)(yi)種(zhong)是(shi)有(you)柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)頭塌(ta)陷的(de)(de)色(se)譜柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)不(bu)(bu)(bu)宜反(fan)(fan)(fan)沖(chong),因(yin)為(wei)(wei)柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)頭塌(ta)陷了在柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)頭上留下空間,反(fan)(fan)(fan)沖(chong)會(hui)導致柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)床移動,填(tian)料(liao)松動、重新分布(bu),但這(zhe)種(zhong)柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)子您(nin)認為(wei)(wei)還(huan)能(neng)使用嗎(ma)?柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)頭塌(ta)陷意味著柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)頭前面造成比(bi)較大的(de)(de)死體(ti)積,峰形只怕是(shi)早就變樣(yang)(yang)了,您(nin)還(huan)能(neng)指望(wang)用這(zhe)樣(yang)(yang)的(de)(de)柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)子進(jin)行分析(xi)?所以對(dui)這(zhe)種(zhong)柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)子而言反(fan)(fan)(fan)不(bu)(bu)(bu)反(fan)(fan)(fan)沖(chong)已經(jing)沒有(you)任何意義(yi)了,因(yin)為(wei)(wei)它已經(jing)是(shi)根廢柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)子。
再說說為(wei)什么要正向(xiang)使用,這個跟裝柱(zhu)(zhu)(zhu)的(de)(de)(de)(de)(de)方向(xiang)有關系,和上(shang)面說的(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)樣(yang),裝柱(zhu)(zhu)(zhu)的(de)(de)(de)(de)(de)時(shi)候是(shi)(shi)按照與(yu)柱(zhu)(zhu)(zhu)身箭頭(tou)相反的(de)(de)(de)(de)(de)方向(xiang)裝填(tian)的(de)(de)(de)(de)(de),在底(di)(di)部(bu)的(de)(de)(de)(de)(de)填(tian)料(liao)會(hui)(hui)比較(jiao)緊(jin)一(yi)些(由于(yu)高壓下不(bu)銹鋼(gang)管(guan)(guan)會(hui)(hui)發(fa)生(sheng)細微的(de)(de)(de)(de)(de)形變,管(guan)(guan)徑增(zeng)大,而裝柱(zhu)(zhu)(zhu)完成(cheng)(cheng)后不(bu)銹鋼(gang)管(guan)(guan)恢(hui)復原狀,柱(zhu)(zhu)(zhu)內填(tian)料(liao)能支撐一(yi)定的(de)(de)(de)(de)(de)壓力,使這段壓力無法排除會(hui)(hui)保留在色譜柱(zhu)(zhu)(zhu)的(de)(de)(de)(de)(de)底(di)(di)部(bu),其結(jie)果是(shi)(shi)底(di)(di)部(bu)的(de)(de)(de)(de)(de)填(tian)料(liao)會(hui)(hui)更緊(jin)密一(yi)些),如(ru)果把(ba)新柱(zhu)(zhu)(zhu)子(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)入(ru)口端篩板(ban)打開(kai)您(nin)會(hui)(hui)發(fa)現(xian)填(tian)料(liao)會(hui)(hui)多出來(lai)約1mm左右,就是(shi)(shi)這個道理。既然我們(men)知道打開(kai)后會(hui)(hui)凸出來(lai)1mm,那(nei)么就不(bu)難理解正向(xiang)使用的(de)(de)(de)(de)(de)必(bi)要性(xing)了,因(yin)(yin)為(wei)柱(zhu)(zhu)(zhu)頭(tou)上(shang)的(de)(de)(de)(de)(de)填(tian)料(liao)有所損失能得(de)到及(ji)時(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)補(bu)充(填(tian)料(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)損失通常(chang)是(shi)(shi)從柱(zhu)(zhu)(zhu)頭(tou)開(kai)始的(de)(de)(de)(de)(de),主要是(shi)(shi)針對樣(yang)品(pin)中傷柱(zhu)(zhu)(zhu)子(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)成(cheng)(cheng)份,而來(lai)自(zi)流動相造成(cheng)(cheng)的(de)(de)(de)(de)(de)損傷往往是(shi)(shi)整(zheng)體性(xing)的(de)(de)(de)(de)(de),因(yin)(yin)為(wei)進樣(yang)量是(shi)(shi)很(hen)少的(de)(de)(de)(de)(de),流動相的(de)(de)(de)(de)(de)用量卻很(hen)大),不(bu)至(zhi)于(yu)柱(zhu)(zhu)(zhu)頭(tou)塌陷(xian),造成(cheng)(cheng)死體積。
還說一(yi)下反向沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)的(de)(de)(de)(de)優勢。兩個(ge)理(li)由,一(yi)是(shi)(shi)固(gu)體顆粒(li)物質通常會累(lei)積(ji)在(zai)柱頭(tou)(tou)上,正(zheng)向沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)是(shi)(shi)無法(fa)洗(xi)(xi)(xi)下來(lai)的(de)(de)(de)(de),而(er)反向沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)則多多少(shao)(shao)少(shao)(shao)能沖(chong)(chong)(chong)下來(lai)一(yi)些,延緩了柱壓升高的(de)(de)(de)(de)時(shi)間(jian)(jian)。二(er)是(shi)(shi)強保留物質在(zai)柱頭(tou)(tou)上的(de)(de)(de)(de)累(lei)積(ji),正(zheng)向沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)需要沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)整(zheng)個(ge)柱床(chuang)(chuang)的(de)(de)(de)(de)距(ju)離(li),本身就是(shi)(shi)強保留的(de)(de)(de)(de)東西,要想把它(ta)沖(chong)(chong)(chong)下來(lai)得需要花多少(shao)(shao)時(shi)間(jian)(jian)?也(ye)許用純甲醇(chun)或乙腈沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)1個(ge)小時(shi)也(ye)沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)不下來(lai),反而(er)造(zao)成了對(dui)柱床(chuang)(chuang)的(de)(de)(de)(de)二(er)次污(wu)染(ran);而(er)反沖(chong)(chong)(chong)則只需要沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)柱頭(tou)(tou)上一(yi)點(dian)點(dian)的(de)(de)(de)(de)距(ju)離(li),也(ye)許1cm長(chang)度都不到,相比正(zheng)向沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)(xi)該要容(rong)易得多。
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