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液(ye)相色譜(LC)系統故障排查(cha)指南
現象:基線隨時間持(chi)續向上或向下移動,而非保持(chi)水平
流動相檢查:
溶劑(ji)純(chun)度/質量:是否使用HPLC級溶劑(ji)?水相是否滋生(sheng)微(wei)生(sheng)物?
混合均(jun)勻性:梯度程序(xu)設置是否正確?是否充分脫氣(qi)?
溫度(du)穩(wen)定性:柱溫箱溫度(du)是否穩(wen)定?環(huan)境溫度(du)波動是否超(chao)過±2℃?
檢測器檢查:
光源(yuan)穩定性:氘燈(deng)/鎢燈(deng)使用時(shi)長是否超過2000小時(shi)?
流(liu)通池:池內是否有氣泡?池窗(chuang)清潔度如何?
色譜柱檢查:是否完成平衡(建議10-30倍柱體積沖洗)?
系統(tong)泄漏:檢查所(suo)有高壓連接處(建議使(shi)用檢漏液)
立即更換新鮮HPLC級溶劑,使用0.22μm濾(lv)膜(mo)過濾(lv)
重新(xin)配(pei)制緩(huan)沖鹽溶(rong)液,使用pH計(ji)精(jing)確校(xiao)準
執行流(liu)通(tong)池清洗程(cheng)序(推薦使用(yong)10%稀硝酸30分鐘)
檢查所有管路接頭,重(zhong)點檢查泵后至進樣器段
現(xian)象(xiang):基線(xian)呈現(xian)高頻毛(mao)刺狀抖動,噪聲值(zhi)超過0.5mAU
氣泡(pao)問題:流動相是否脫氣?溶劑瓶(ping)濾頭是否堵塞(sai)?
檢測器光源:是否出(chu)現能量輸出(chu)波動(建(jian)議使用(yong)內置診斷(duan)程(cheng)序檢測)
泵(beng)系(xi)統:單向(xiang)閥清洗頻率是否低于(yu)推(tui)薦值(建議每(mei)500小時清洗)
執行三步排氣法:溶劑瓶(ping)排氣 → 泵頭排氣 → 流通池排氣
更換(huan)檢測器光源(氘(dao)燈建議每2000小時更換(huan))
使用(yong)異丙醇(chun)超聲清洗單向(xiang)閥(fa)(40kHz,20分鐘)
現(xian)象(xiang):系統壓(ya)(ya)力(li)超過正常值20%以上或達到儀器壓(ya)(ya)力(li)上限
保護柱(zhu)/在(zai)線過濾(lv)器(qi)(80%故(gu)障源于此)
色譜柱入(ru)口篩(shai)板(建議使用20倍放大(da)鏡觀察(cha))
進樣系統(檢(jian)查(cha)定量環體積(ji)是否匹配)
泵出口(kou)過(guo)濾器(建議每3個月(yue)檢(jian)查)
執(zhi)行分(fen)段壓力(li)測試(shi)(斷開色譜柱觀(guan)察壓力(li))
反向沖(chong)洗(xi)色譜柱(流速≤1ml/min,持(chi)續30分鐘)
使用DMF超聲清洗進樣(yang)針(60℃,30分鐘(zhong))
現象:系統壓(ya)力低于正常值30%或無法建立壓(ya)力
立即(ji)執行系統(tong)保壓測試(關(guan)閉所有出(chu)口(kou)觀(guan)察(cha)壓力變化)
檢(jian)查溶劑瓶液位(建議設置低液位報警)
執行(xing)Purge/Prime程序(建議使用100%甲醇沖洗)
現象:峰不對(dui)稱度(As) > 1.2,后沿呈(cheng)現明顯平(ping)臺
流動相優(you)化(hua):添加0.1%三乙胺(堿性(xing)化(hua)合物)或0.05%醋酸(酸性(xing)化(hua)合物)
色譜(pu)柱維護(hu):執行(xing)柱再生程序(甲醇:乙腈(jing)=1:1,24小時沖(chong)洗)
系(xi)統升級:將管路內徑從(cong)0.010"改(gai)為(wei)0.005"(可減少30%柱外效應)
高壓(ya)操(cao)作(zuo):系統壓(ya)力可達6000psi,操(cao)作(zuo)時必須佩戴(dai)防護眼(yan)鏡和手套
化學品處理:使用(yong)有機溶劑時應在通風櫥(chu)內操(cao)作
斷電(dian)(dian)維護(hu):進行(xing)管(guan)路連接/拆卸前(qian)務必關閉電(dian)(dian)源并釋放系統(tong)壓力(li)
注:本指南(nan)建(jian)議(yi)(yi)配(pei)合廠商(shang)維護(hu)手冊使用,定期更換消(xiao)耗(hao)品(泵密(mi)封(feng)圈(quan)建(jian)議(yi)(yi)每(mei)(mei)500小時(shi)更換,進樣針密(mi)封(feng)墊每(mei)(mei)1000次進樣更換)。建(jian)議(yi)(yi)建(jian)立設備維護(hu)日志(zhi),記錄壓力、流速等關(guan)鍵參數變化趨勢。
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